TaqMan-小沟结合物荧光探针对青海省青南地区104株鼠疫菌链霉素耐药基因rpsL突变位点的筛查

摘要：

目的 了解青海省青南地区rpsL基因点突变引起鼠疫菌耐链霉素的现状,为今后青南地区突发人间鼠疫的精准临床用药及预防耐药发生提供理论依据.方法 筛选1957-2009年青海省青南地区取自鼠疫患者、媒介昆虫体内及中间宿主的104株代表性鼠疫菌,用赫氏平皿进行分离培养,采用十二烷基磺酸钠裂解和苯酚-氯仿法提取代表性鼠疫菌的DNA,针对我国链霉素耐药基因rpsL基因设计引物及TaqMan-小沟结合物(minor groove binder,MGB)探针Probe1[FAM]和 Probe2[VIC],利用 TaqMan-MGB荧光探针的实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,对青南地区104株鼠疫菌链霉素耐药位点rpsL基因的突变情况进行检测.结果 青南地区104株被试菌株FAM检测结果均为阳性,对应检测rpsL(128:A),相对荧光单位(relative fluorescence unit,RFU)峰值＞1 000,阴性＜200.所有被试菌株VIC检测结果均为阴性,对应检测rpsL(128:G),RFU峰值＜200,阳性＞1 000.即青南地区104株鼠疫菌中未发现耐链霉素rpsL基因点突变菌株.结论 了解到青南地区鼠疫菌耐链霉素菌株分布情况,为青南地区预防耐药发生以及鼠疫菌临床治疗提供了基础数据.

关键词：鼠疫菌、TaqMan-小沟结合物荧光探针、链霉素、rpsL基因、筛查

所属期刊栏目：23

分类号：R378.6+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金;青海省科技厅基础研究计划项目

在线出版日期：2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：662-666