红景天苷抑制库普弗细胞的HMGB1产生保护热射病小鼠肝损伤

摘要：

目的 肝损伤是重症中暑的常见并发症,是导致患者死亡的直接原因.本研究拟探讨红景天苷(salidroside,Sal)对热射病小鼠急性肝损伤的保护作用及其可能机制.方法 动物实验部分,将40只ICR (institute of cancer research)小鼠随机分为空白对照组、Sal对照组、热射病组、Sal干预组.苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色后观察小鼠肝脏损伤的程度.检测肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)的改变.体外实验部分,分离和培养库普弗细胞(Kupffer cells,KCs),以不同终浓度(80 μmol/L、160 μmol/L及320 μmol/L)的Sal预处理KCs 24 h,43℃±0.5℃热应激2h.MTT [3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide]比色法检测细胞存活率.采用相应的试剂盒测定各组细胞上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)和高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)释放量.采用实时聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)评估HMGB1的mRNA表达.应用细胞核/细胞质提取试剂盒提取细胞核和细胞质蛋白,Western印迹法观察HMGB1从细胞核向细胞质转移的变化.结果 本实验条件下,动物实验部分,与空白对照组、Sal对照组相比,热射病小鼠肝脏病理损伤主要表现为肝细胞肿胀、透明或水样变性,伴随肝功能指标ALT和AST的明显升高;与热射病组相比,Sal干预能够缓解其肝细胞肿胀、透明或水样变性等病理改变并降低热射病小鼠血清ALT和AST水平.细胞实验部分,热刺激可诱导KCs上清液中LDH、MDA以及TNF-α释放,而随着Sal剂量的增加,可显著抑制热应激诱导的LDH、MDA以及TNF-α释放,提高细胞的存活率.且Sal显著抑制热应激诱导的HMGB1表达和分泌,以及HMGB1从细胞核向细胞质的易位.结论 Sal保护热射病小鼠肝损伤,可能是通过其抑制KCs的HMGB1表达和分泌,以及HMGB1从细胞核向细胞质的易位发挥作用.

关键词：热射病、红景天苷、库普弗细胞、肝损伤、高迁移率族蛋白1 (HMGB1)

所属期刊栏目：18

分类号：R594.1+2(全身性疾病)

资助基金：国家自然科学基金81472952;全军后勤科研“十二五”计划重点项目BWS14J023

在线出版日期：2018-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：747-753