TaqMan探针实时荧光PCR快速检测奶粉中沙门氏菌的研究

摘要：

目的 建立快速、灵敏地检测奶粉中沙门氏菌的TaqMan探针实时荧光PCR方法.方法 根据沙门氏菌的invA基因序列设计引物与TaqMan探针,建立并评价实时荧光PCR反应体系的特异性,制备鼠伤寒沙门菌标准株(CMCC 50115) 10倍梯度稀释的菌液,检测对纯菌液的灵敏度,制备染菌量分别为1.4×(100～105)CFU/25 g奶粉的样本进行人工染菌量试验,在增菌0、4、8、12、16、20、24、36和48 h时各取1 mL培养液,提取DNA进行TaqMan实时荧光PCR检测,同步进行传统细菌分离,比较2种方法对人工染菌标本的最低检测限.结果 建立的沙门氏菌TaqMan探针实时荧光PCR仅需40min即可完成检测,与志贺氏菌、大肠埃希氏菌等非目标细菌无交叉反应,对纯菌检测下限为1.4 CFU/mL,对染菌量为1.4× 100 CFU/25 g奶粉的检测下限仅需增菌16h即可检测出来,而要达到这个检测限,传统方法则需要36h.结论 沙门氏菌TaqMan探针实时荧光PCR快速、特异、灵敏,可用于婴幼儿奶粉中沙门氏菌的快速筛查,提高食品安全风险监测的速度和灵敏度.

关键词：沙门氏菌、实时荧光PCR、TaqMan探针、食品安全风险监测

所属期刊栏目：15

分类号：R378.22(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广东省肇庆市科技创新计划项目No.2013E1810

在线出版日期：2015-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1165-1168