血小板源性生长因子和血小板源性内皮细胞生长因子在内皮细胞和血管平滑肌细胞中的作用研究

摘要：

目的：通过体外转染血小板源性生长因子（ PDGF）和血小板源性内皮细胞生长因子（ PD-ECGF）质粒，观察两种生长因子对人脐静脉内皮细胞EAHY926和主动脉血管平滑肌细胞T/G HA-VSMC的影响，评估两种生长因子对血管损伤治疗的可行性。方法构建人pcDNA 3.1（＋）空载（空载组）、pcDNA 3.1（＋）-PDGF-透明质酸（HA）（PPH 组）和 pcDNA 3.1（＋）- PD-ECGF - HA（PPEH 组）质粒，分别转染入 EAHY926和 T/G HA-VSMC中，四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（ MTT法）检测内源性PD-ECGF和外源性PD-ECGF对EAHY926和T/G HA-VSMC细胞增殖的影响；细胞伤痕实验观察内源性PD-ECGF和外源性PD-ECGF对 EAHY926和T/G HA-VSMC细胞迁移速度的影响。结果 MTT 法检测3组 EAHY926吸光度值比较，差异有统计学意义（ F ＝235.18，P＜0.001），其中PPH组高于空载组和PPEH组（P＜0.05）；空载组与PPEH组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。MTT法检测3组T/G HA-VSMC吸光度值比较，差异有统计学意义（ F＝82.89，P＜0.001），其中PPH组高于空载组（P＜0.05）；PPEH组低于空载组（P＜0.05）。MTT法检测转染PPEH质粒的培养基（L-PPEH）对PPH诱导的EAHY926和T/G HA-VSMC增殖的影响，空载组、PPH组、PPH＋L-PPEH组EAHY926吸光度值比较，差异无统计学意义（F＝512.89，P＝0.183）。空载组、PPH组、PPH＋L-PPEH组T/G HA-VSMC吸光度值比较，差异有统计学意义（F＝317.40，P＜0.001）；其中PPH组高于空载组和PPH＋L-PPEH组（P＜0.05）。细胞伤痕实验证实，转染PPEH质粒的EAHY926、T/G HA-VSMC细胞迁移能力增强；PPEH组EAHY926平均细胞迁移距离百分比（56.1%±2.2%）较空载组（27.8%±3.4%）升高（t＝-15.08，P＜0.001）；PPEH组T/G HA-VSMC平均细胞迁移距离百分比（69.1%±2.3%）较空载组（43.6%±5.8%）升高（t＝-33.64，P＜0.001）。用转染PPEH质粒的培养基培养EAHY926、T/G HA-VSMC发现，外源性PD-ECGF处理的EAHY926、T/G HA-VSMC细胞迁移能力亦明显增强。结论通过转染PDGF质粒，模拟血管损伤后内皮细胞和平滑肌细胞受到PDGF和/或PD-ECGF刺激，发现 PDGF能明显上调内皮细胞和血管平滑肌的增殖和迁移。PD-ECGF对血管内皮细胞增殖的效果不明显，但能上调血管内皮细胞和血管平滑肌的迁移速度；同时PD-ECGF能抑制血管内皮细胞的增殖。两种因子同时使用能抑制平滑肌细胞的过度增殖，促进内皮细胞和平滑肌细胞的迁移。两者联合使用可能成为促进经皮冠状动脉介入术（ PCI）后损伤血管恢复及预防血管再狭窄的新策略。

关键词：血小板源性生长因子、血小板源性内皮细胞生成因子、血管成形术、气囊、冠状动脉、肌细胞、平滑肌、内皮细胞、细胞增殖

分类号：R349.51(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：贵州省科技厅社会发展项目黔科合SY[2010]3087号

在线出版日期：2015-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1023-1028