MIA基因-RNAi对人黑素瘤A375细胞增殖的影响

摘要：

目的 探讨RNA干扰技术抑制恶性黑素瘤细胞株A375 MIA基因表达后,对A375细胞增殖的影响.方法 构建针对人黑素瘤A375细胞(MIA)基因3个不同靶序列的RNAi真核表达载体pLTE-hMIA-RNAi,用磷酸钙细胞转染法把构建的载体分别转染HEK293细胞,采用Western技术和RT-PCR技术分别检测MIA基因蛋白的表达和mRNA水平.选择对MIA基因表达抑制作用最强的RNAi载体转染A375细胞后,用细胞计数检测细胞增殖的变化.结果 构建的3个RNAi质粒和对照组相比,pLTE-hMIA-RNAi352质粒对MIA的表达减少量＞80%,hMIA的mRNA水平下降约83%,与对照组比较差异有显著性意义.而pLTE-hMIA-RNAi203、pLTE-hMIA-RNAi343质粒对MIA的表达及mRNA水平的影响,与对照组比较差异无显著性意义.转染pLTE-hMIA-RNAi352质粒的A375细胞增殖能力较对照组显著下降.结论 构建的针对人MIA基因352位靶序列的RNAi质粒pLTE-hMIA-RNAi352可显著抑制MIA的表达及A375细胞增殖.

关键词：黑素瘤、MIA基因、RNA干扰

所属期刊栏目：20

分类号：R739.5(肿瘤学)

在线出版日期：2007-01-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：708-711