靶向角蛋白17基因的小干涉RNA对角质形成细胞增生与凋亡的影响

摘要：

目的利用RNA干涉技术诱导角蛋白17(K17)基因沉默,观察其对角质形成细胞(KC)增生和凋亡等生物学活性的影响.方法合成两条含有针对人K17mRNA序列的正义和反义寡核苷酸,退火后与表达载体psilencer3.1-H1 neo相连接,经鉴定后转染人角质形成细胞系HaCaT,分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)检测转染细胞K17 mRNA与蛋白水平的改变,用流式细胞仪检测转染细胞的细胞周期及凋亡情况,并通过透射电镜观察细胞的凋亡.结果成功构建了靶向人K17基因的siRNA表达载体psilencer3.1/K17,检测到瞬时转染的HaCaT细胞中K17的蛋白水平及mRNA水平均明显下降.流式细胞仪检测表明转染细胞的细胞周期发生了明显的G1期阻滞并证实凋亡的存在,电镜下观察到凋亡小体.结论对于增生活跃的角质形成细胞,K17的表达对其增生、分化和凋亡等生物学活性具有重要影响.靶向K17的siRNA能够抑制角质形成细胞增生,诱导其凋亡.

关键词：角蛋白17、角质形成细胞、RNA、干涉、银屑病

所属期刊栏目：20

分类号：R392.13

资助基金：中国科学院项目（非规范项目）30371650

在线出版日期：2006-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：201-203