实时荧光定量PCR法鉴定婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种

摘要：

该研究通过系统发育树分析确定目标基因,并设计引物和探针,建立一种婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobac-teriumanimalis subsp.lactis)的实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)鉴定方法.通过特异性、灵敏性和抗干扰实验对该方法进行验证,并对市售的64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的婴幼儿配方乳粉样品进行检测.结果表明,atpD基因在动物双歧杆菌乳亚种间具有较高的种间特异性,种间差异率>10％,确定其为目标基因.基于该基因建立的RT-fqPCR方法能够特异性的检测动物双歧杆菌乳亚种,检测绝对灵敏度可以达到1 pg/μL,相对灵敏度可以达到103 CFU/mL;基因水平和培养物水平抗干扰能力良好.采用该方法从64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的乳粉样品中均能检测出动物双歧杆菌乳亚种,表明基于atpD基因建立的RT-fqPCR方法能够快速准确的对动物双歧杆菌乳亚种进行检测.

关键词：实时荧光定量PCR、动物双歧杆菌乳亚种、atpD基因、鉴定、婴幼儿配方乳粉

所属期刊栏目：41

分类号：Q93-331(微生物学)

资助基金：国家市场监督管理总局科技计划2019MK004

在线出版日期：2022-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：224-230