土壤宏基因组中芽孢杆菌信号肽的克隆及分析

摘要：

从土壤宏基因组中筛选获得在芽孢杆菌中高效分泌重组蛋白的信号肽.通过数据分析,将预测到的信号肽DNA片段与蛋白酶基因融合,在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) WB800和地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) DL6中表达,进行胞外蛋白酶酶活测定.筛选得到25个可能来源于G+菌的信号肽序列,胞外蛋白酶活性分析的结果显示,有14个信号肽具有较好的分泌蛋白酶的能力,其中引导效果最好的信号肽(sig20)是蛋白酶自身信号肽的1.64倍.将高分泌信号肽转化到地衣芽孢杆菌中,证实其在地衣芽孢杆菌同样具有较好的引导效果.应用生物信息学与宏基因组学相结合的方法,可有效获得高效的芽孢杆菌信号肽序列,为蛋白质高效分泌表达系统的构建提供丰富的表达元件.

关键词：宏基因组、信号肽、芽孢杆菌、蛋白酶

所属期刊栏目：35

分类号：S15;S43

资助基金：国家高技术研究发展计划‘863计划’项目2014AA021303,2014AA021302;天津市应用基础与前沿科学研究计划13JCYBJC39500

在线出版日期：2016-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：138-142