禽源奇异变形杆菌质粒介导AmpC酶基因型检测与质粒分析

摘要：

[目的]研究禽源奇异变形杆菌携带ampC基因的分型和blaCMY-2阳性接合质粒pC12的序列结构,为防控多重耐药禽源奇异变形杆菌的传播提供理论基础.[方法]利用头孢西丁三维试验和PCR方法对21株奇异变形杆菌进行AmpC酶的检测和基因分型研究;对blaCMY-2阳性菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型和接合试验;利用高通量测序技术获得pC12的核苷酸序列并进行比较分析.[结果]头孢西丁三维试验表明21株禽源奇异变形杆菌中有6株产AmpC酶.6株产AmpC酶奇异变形杆菌对氨苄西林、头孢西丁、多西环素、氟苯尼考、粘菌素全部耐药,而对头孢他啶、阿米卡星全部敏感.耐药基因PCR扩增和测序结果表明,6株菌均携带blaCMY-2,检出率为28.6％.接合试验表明,1株奇异变形杆菌C12接合成功并获得接合子,其余5株接合不成功.PFGE分型结果表明,酶切图谱分为3个型别,blaCMY-2在禽源变形杆菌中存在垂直和水平传播.测序结果表明菌株C12含有一个1b型IncC质粒,其全长161319 bp,GC含量为52.45％,预测有161个开放阅读框,提交NCBI并获得序列号MT320534.该质粒包含3个耐药区:第一个抗生素耐药区(antibiotic resistance islands,ARI-B)携带floR、tet(A)、strA、strB和sul2;第二个耐药区是一个典型的ISEcp1-blaCMY-2-blc-sugE结构,其中的ISEcp1被一个插入的IS10R截断;第三个耐药区(ARI-A)是一个杂合的Tn1696tnp-pDUmer转座子,包含一个1类整合子基因盒(aac(6')-Ib-cr|arr3|dfrA27|aadA16)和汞抗性基因簇merEDBAPTR,其插入到质粒骨架产生两个重复序列TTGTA,该耐药区也是1型IncC耐药区变化最大的区域.[结论]6株产AmpC酶禽源奇异变形杆菌均携带blaCMY-2,其酶切图谱分为3个PFGE型别,其中一株菌携带了一个流行的blaCMY-2阳性1型IncC可接合质粒.广宿主的IncC质粒是blaCMY-2、tet(A)、floR等多个耐药基因及整合子的重要载体之一,该质粒在动物源奇异变形杆菌的传播扩散进一步增加了治疗该菌感染的难度,应引起足够的重视.

关键词：奇异变形杆菌;IncC质粒;AmpC β-内酰胺酶;blaCMY-2;Tn1696转座子

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资助基金：国家自然科学基金-河南人才培养联合基金U1504326

在线出版日期：2021-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：3780-3788