鸭出血性卵巢炎病毒血症研究

摘要：

【目的】阐明鸭出血性卵巢炎病毒（DHOV-HB株）感染鸭后的病毒血症，为深入了解鸭出血性卵巢炎的发病机理、诊断和疫苗研究提供依据。【方法】24只250日龄北京鸭芯片标记后分别经口感染100倍稀释的DHOV-HB株（3×104ELD50），并设空白对照组15只，同等条件下分别在隔离器内饲养，逐日观察10日，各组每日经翅静脉采集10只鸭血液（尽可能采集同一只鸭血液），用于病毒分离和抗体测定。将攻毒后1—10 d的血清样本经卵黄囊途径接种6日龄SPF鸡胚，每份血清以0.1 mL/胚的剂量接种5枚SPF鸡胚，鸡胚接种后置于37℃条件下继续孵化，每日定时照胚2次，及时收获并统计24—168 h之内死亡的鸡胚，死亡鸡胚胚体经剪碎，研磨，离心后采用RT-PCR的方法检测病毒核酸，有1枚及1枚以上死亡鸡胚，且DHOV病毒核酸检测阳性，即将该鸭判为病毒分离阳性。同时采用中和试验测定攻毒后4—10 d的血清抗体，每个血清稀释度接种5枚SPF鸡胚。鸡胚接种途径及特异性死亡的判定方法同上。判定标准如下：血清原液保护80%（4/5）以上的鸡胚判为抗体阳性，保护20%—60%（1/5—3/5）的鸡胚判为抗体可疑，不保护鸡胚（0/5）判为抗体阴性。【结果】试验鸭感染DHOV后的病毒血症和免疫反应密切相关。感染后1—3 d，病毒血症出现并达到高峰，病毒分离均100%（10/10）阳性；4—6 d病毒分离率开始下降，分别为90%（9/10）、70%(7/10)和30%（3/10）阳性；7—10日血清中不再存在病毒，均为阴性(0/10)。中和试验结果表明攻毒后4 d，血清中病毒分离率下降的同时血清中即可能存在较低滴度的抗体，鸡胚死亡时间延后，此时抗体100%（10/10）阴性；攻毒后6 d的血清抗体80%（8/10）阴性，20%（2/10）可疑；攻毒后7 d 70%（7/10）阳性，10%（1/10）阴性，20%（2/10）可疑；攻毒后9 d 90%（9/10）阳性，10%（1/10）可疑；攻毒后10 d 100%（10/10）阳性。空白对照组血清病毒分离（1—10 d）和抗体检测（4—10 d）均为阴性。【结论】（1）DHOV口服感染成年鸭后，1—3d日血清病毒分离率最高，感染后4d 病毒分离率开始下降，感染后7d血清病毒分离阴性。感染后7d抗体70%（7/10）阳性，感染后10 d 100%（10/10）阳性；（2）病毒血症的持续时间与特异性免疫应答密切相关。

关键词：鸭、鸭出血性卵巢炎、坦布苏病毒、病毒血症

分类号：S852.65;R373.1+3;R563.1

资助基金：科技创新能力建设专项;北京市农林科学院青年基金

在线出版日期：2015-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：4733-4738