绵羊RARG基因在发情不同阶段卵巢中的mRNA表达

摘要：

分离鉴定绵羊视黄酸受体-γ（Retinoic acid receptor gamma，RARG）基因，分析该基因的分子特征，研究其在发情周期不同阶段卵巢中的表达差异。选取年龄和体况相近、健康的甘肃高山细毛羊周岁母羊8只，通过同期发情处理，根据卵巢生理状态，将其分为两组：黄体期组和卵泡期组，各4只，屠宰后，采集卵巢组织，以周岁母羊卵巢组织RNA为模板，采用RT-PCR技术扩增绵羊RARG基因并克隆到pMD18-T载体中进行测序验证。利用ORF Finder和DNAStar等生物信息学软件分析绵羊RARG基因的理化性质、同源性和预测结构域和功能。利用Q-PCR技术，检测绵羊RARG基因在母羊发情周期不同阶段卵巢组织中的相对表达量，用SPSS19.0软件进行差异显著性分析，探讨RARG基因对绵羊发情周期的调控机制。获得了绵羊RARG基因包含完整编码区序列在内的1588 bp的绵羊RARG基因序列，并提交至NCBI，GenBank登录号为KF019682。该序列含有1个1377 bp的完整开放阅读框（Open reading frame，ORF），编码458个氨基酸，其蛋白分子质量为50955.8 D，理论等电点为7.45。绵羊 RARG 基因与牛、普通狨、家犬、仓鼠、家猫、人、小鼠、虎鲸、狒、家鼠、野猪、海牛、海豚和蟾蜍等14个物种的同源性分析，结果显示RARG基因在上述物种间高度保守，且与牛的亲缘关系较近，序列同源性最高。GO 功能分析结果显示，绵羊 RARG 基因作为结构蛋白参与转录调控的几率最高，分别为0.272和0.223。在绵羊RARG基因编码的氨基酸序列上发现了2个功能结构域，分别是核激素受体c4锌指结构域（c4 zinc finger in nuclear hormone receptors，ZnF_C4）和激素受体配体结构域（ligand binding domain of hormone receptors，HOLI）。Q-PCR结果显示，绵羊RARG mRNA 在甘肃高山细毛羊卵泡期卵巢中的相对表达量显著高于黄体期（P<0.05）。绵羊RARG基因在物种间高度保守，含有ZnF_C4和HOLI等2个与转录调控相关的功能结构域，推测该基因可能作为一种重要的转录因子参与母羊发情周期调控。

关键词：绵羊、发情周期、卵巢、RARG基因、mRNA表达

分类号：S82;S8

资助基金：甘肃农业大学动物科学技术学院青年教师科研基金2011DK005

在线出版日期：2014-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：3069-3076