筛选和转化药用野生稻TAC克隆获得耐旱水稻

SHAHID Muhammad Qasim傅雪琳刘向东刘耀光刘蕊卢永根张欢欢陈志雄

华南农业大学;

摘要：

【目的】利用分子生物学技术建立一种可有效转移药用野生稻有利基因的方法，为进一步大量开展利用药用野生稻有利基因提供技术基础。【方法】以植物抗性相关转录因子AP2/EREBP和bZIP家族基因保守序列为探针，采用同位素α-32P对探针进行标记，通过Southern 杂交对药用野生稻TAC文库进行第一轮筛选；所获得阳性克隆用地高辛标记的探针进行第二轮筛选；最后利用PCR方法对第二轮筛选所获得的阳性克隆进行验证。通过农杆菌介导法将阳性克隆转入栽培稻品种日本晴，利用TAC载体插入片段两端的抗性标记Hpt和SacB，通过PCR扩增检测和和Southern杂交对转化植株进行鉴定。采用PEG胁迫法和生理指标变化对转基…展开v

关键词：药用野生稻(Oryza officinalis Wall.)、TAC文库、遗传转化、耐旱性

分类号：S51;S43

资助基金：广东省自然科学重点基金项目10251064201000001;国家公益性行业农业科研专项201003021

在线出版日期：2014-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共13页

页码：1445-1457