含有扩增内标的食品中猪肉和鸡肉成分Taqman探针实时荧光PCR检测方法的建立

摘要：

[目的]建立含有扩增内标（IAC，Internal amplification control）的用于食品中猪肉和鸡肉成分鉴别的Taqman探针实时荧光PCR检测方法。[方法]分别基于猪的beta actin 基因和鸡的transforming growth factor 基因设计引物和探针；考察引物和探针的特异性与灵敏度；设计并构建扩增内标，优化体系中扩增内标浓度，建立内标实时荧光PCR体系；使用该检测体系对鲜肉和熟肉来源的DNA模板进行检测评价；应用该体系对市售38份样本进行盲样检测。[结果]含有扩增内标的Taqman探针实时荧光PCR体系能有效地进行食品中猪肉和鸡肉成分的快速检测，非目标物种在40个循环内均无出现扩增，检出限均为0.5 ng DNA；该体系对鲜肉和熟肉来源的DNA模板检测无显著差异；对市售食品样本的鉴别验证了方法的实用价值。[结论]该方法准确稳定，可用于食品中猪肉和鸡肉成分的快速检测。

关键词：扩增内标、检测、实时荧光PCR、鸡肉成分、猪肉成分

分类号：R155.5;R372;TP311.13

资助基金：公益性行业农业科研专项;“十二五”国家科技计划农村领域项目;农业科技成果转化资金

在线出版日期：2013-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：4578-4585