10.3864/j.issn.0578-1752.2013.18.007
斜纹夜蛾受翻译控制肿瘤蛋白基因的克隆及表达
”目的”克隆斜纹夜蛾受翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因,分析其序列特征,为深入研究该基因奠定基础。”方法”利用RACE末端快速扩增技术,在斜纹夜蛾卵巢细胞中克隆TCTP基因的全长。根据不同物种间TCTP基因的同源性来构建进化树,并在原核细胞中对斜纹夜蛾TCTP进行表达。”结果”克隆得到斜纹夜蛾TCTP基因全长cDNA,登录号为HQ896486.1。序列分析表明,该基因cDNA全长829 bp,开放阅读框长519 bp,编码含172个氨基酸的蛋白,蛋白分子质量19.67 kD。生物信息学分析表明,斜纹夜蛾 TCTP 基因属于受翻译控制肿瘤蛋白家族,与其它物种TCTP基因有很高相似性。构建重组质粒 pET32a(+)-TCTP,在大肠杆菌中表达重组蛋白,确定了1 mmol·L-1 IPTG诱导4 h为重组蛋白表达的最佳条件,在短期内能得到大量稳定性好的TCTP蛋白。”结论”从斜纹夜蛾卵巢细胞中克隆得到斜纹夜蛾 TCTP 基因全长 cDNA,并且成功在原核细胞中进行表达。本研究为深入研究斜纹夜蛾TCTP的功能以及针对斜纹夜蛾TCTP基因RNAi干扰的生物防控提供了理论依据和技术支持。
斜纹夜蛾、TCTP基因、克隆和表达、序列分析
R73;R38
农业部行业专项200903052;广东省科技基础条件建设项目20110608
2013-12-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
3793-3799