稻曲病菌突变体B-726生物学性状分析及其T-DNA插入位点侧翼序列的克隆

摘要：

[目的]分析稻曲病菌T-DNA插入突变体库中致病力减弱突变菌株B-726的生物学性状,分析其T-DNA插入位点的侧翼序列,克隆因外源基因插入被破坏正常表达的基因,为明确该基因在稻曲病菌致病过程中的作用奠定基础,并为稻曲病防治新途径的制定提供理论依据.[方法]通过测定突变菌株B-726生长速率、产孢能力及致病力检测,分析其生物学性状;Southern杂交分析B-726外源基因插入的拷贝数;利用HiTai1-PCR获得T-DNA插入位点的侧翼序列;运用RACE-PCR技术,克隆与插入位点毗邻的基因全长;用半定量RT-PCR分析该基因表达情况.[结果]突变菌株B-726与野生菌株P1相比致病力极显著下降,产孢能力、生长速率显著下降.Southern 杂交结果显示T-DNA在菌株B-726中以单拷贝形式插入.经过序列分析发现,T-DNA插入在1个命名为Uvt-726上游344 bp处,半定量PCR结果表明,Uvt-726在B-726表达量较P1显著下降.[结论]克隆了1个可能与稻曲病菌致病力相关的基因,推断该基因在稻曲病菌致病过程中起着重要的作用.

关键词：稻曲病菌、T-DNA插入突变、致病力、基因克隆

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资助基金：国家自然科学基金31171802;江苏省农业自主创新基金CX121003-10

在线出版日期：2014-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：3344-3353