食品中4种肉类成分多重PCR的快速鉴别方法

摘要：

[目的]建立快速可靠的用于食品中4种肉类(猪肉、牛肉、羊肉和鸡肉)成分快速鉴别的通用引物多重PCR(universal primers-multiplex PCR,UP-M-PCR)方法.[方法]使用DNeasy试剂盒提取法、SDS-蛋-白酶K法和CTAB-蛋白酶K法分别提取肉类中总DNA,通过比较提取效率和纯度,确定提取肉类中总DNA的方法；基于动物线粒体细胞色素b基因的差异性位点,设计两组各5条长度不同的多重PCR引物,建立并优化多重PCR反应体系,通过电泳检测扩增产物分子量差异实现4种肉类的快速鉴别；应用优化的多重PCR方法对80份市售食品样本进行盲样检测,验证鉴别方法的准确性.[结果]SDS-蛋白酶K法与DNeasy试剂盒提取法的DNA效率显著优于CTAB-蛋白酶K法；在优化的反应条件下,选择特异性高、序列较长的多重PCR引物可有效地进行食品中猪、牛、羊和鸡源性成分的快速鉴定,检测灵敏度达到皮克级DNA,对市售食品样本的鉴别验证了方法的实用价值.[结论]多重PCR方法精确稳定,可用于食品中多种动物源性成分的快速鉴别.

关键词：多重PCR、鉴别、猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉

所属期刊栏目：45

分类号：S816.4(普通畜牧学)

资助基金：公益性行业科研专项;国家质检总局科技计划项目

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1873-1880