基于多重串联式PCR的基因碟片技术检测转基因作物

摘要：

[目的]建立基于多重串联式PCR(multiplexed tandem PCR,MT-PCR)的基因碟片技术,并使之应用于转基因作物的大量、快速和稳定地检测.[方法]以转基因作物研究中常用的调控序列NOS终止子、FMV35S启动子及外源基因NPTⅡ、Cry1Ab、Cry1Ab/Ac、CP4-EPSPS、PAT和玉米内源基因ⅠVR、棉花内源基因sad1、菜籽粕内源基因PEP为检测对象,针对每个基因设计内外2对引物,先进行一次循环数较少(10-20 cycles)的高通量多重PCR,以便在均匀地扩增各基因和调控序列的同时避免引物之间的竞争,然后利用巢式荧光定量PCR检测各个基因和调控序列,最后根据扩增曲线和熔融曲线分析结果.[结果]该方法能够快速(＜2 h)、高通量、准确地(＞0.000292 ng)检测出棉花、玉米、大米、菜籽粕中的多种转基因成分,可以分辨出3种转基因物种,适合大批量检测.[结论]该方法适合转基因作物的高通量、定量检测,具有较好的应用前景.

关键词：转基因、多重串联式PCR、基因碟片技术

所属期刊栏目：45

分类号：S188(农业生物学)

在线出版日期：2012-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1010-1016