大豆孢囊线虫果胶酸裂解酶基因Hg-pel-5的克隆与分析

摘要：

[目的]克隆和分析与大豆孢囊线虫寄生密切相关的果胶酸裂解酶新基因,为研究大豆孢囊线虫寄生和致病的分子机理提供依据,并为探讨大豆孢囊线虫的防控新途径提供理论基础.[方法]通过EST分析结合RACE-PCR扩增方法,从大豆孢囊线虫中克隆出1个果胶酸裂解酶新基因;通过原位杂交和半定量PCR的方法确定基因的表达部位和分析不同发育阶段的基因表达;采用Southern杂交方法分析基因的拷贝数.[结果]从大豆孢囊线虫中克隆出1个全长为957个碱基编码227个氨基酸残基的新果胶酸裂解酶基因Hg-pel-5(GenBank登录号HQ123259).Hg-pel-5基因组由2个外显子和1个内含子组成.预测蛋白含有20个氨基酸残基的信号肽和4段细菌结构的果胶酸裂解酶第三家族的保守位点.原位杂交确定Hg-pel-5在大豆孢囊线虫亚腹食道腺中表达.半定量RT-PCR结果表明Hg-pel-5在寄生前和寄生过程早期的2龄幼虫大量表达.Southern杂交结果显示Hg-pel-5存在于大豆孢囊线虫基因组中并以多拷贝形式存在.[结论]对大豆孢囊线虫中1个新的果胶酸裂解酶基因Hg-pel-5进行克隆和分析,表明该基因在大豆孢囊线虫早期寄生过程中发挥重要作用.

关键词：大豆孢囊线虫、果胶酸裂解酶、基因克隆、原位杂交、Southern杂交

所属期刊栏目：45

分类号：S435.651(病虫害及其防治)

在线出版日期：2012-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：854-866