沙门氏菌内标PCR快速检测试剂盒的研制与应用

摘要：

”目的” 研制一种能有效指示假阴性的PCR检测产品,用于沙门氏菌快速、准确、灵敏的检测.”方法” 针对沙门氏菌invA基因、stn基因序列分别设计引物与扩增内标,建立添加扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法,组装试剂盒,并对试剂盒的各项性能进行评价.”结果” 试剂盒对147株沙门氏菌和28株非沙门氏菌的检测结果显示,所有沙门氏菌均能扩增出362 bp的目标条带,非沙门氏菌仅扩增出520 bp的内标条带.试剂盒检测沙门氏菌基因组DNA的检测限为8.0 fg/PCR,检测染菌量为4-5 CFU/10 mL的牛奶样品,增菌8-10 h即得到阳性结果.反复冻融60次或-20℃下贮存1年,均不影响试剂盒的使用效果.对食品样品的检测结果显示,阳性检出率为2/30,与国标法的检测结果相符,比未添加扩增内标的PCR检测结果(阳性检出率为1/30)准确.”结论” 采用添加扩增内标的PCR试剂盒检测沙门氏菌,特异性强、灵敏度高、稳定性好,并能有效指示假阴性,提高检测的准确性,适用于食品中沙门氏菌的快速筛检.

关键词：沙门氏菌、聚合酶链式反应(PCR)、扩增内标、检测试剂盒

所属期刊栏目：44

分类号：TS207.4;R155(食品工业)

在线出版日期：2012-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3395-3402