大白菜BrARGOS基因的分离与功能分析

摘要：

”目的”从大白菜自交系日喀则的叶片中分离新的拟南芥ARGOS的同源基因,进行氨基酸序列比对和该基因的表达模式分析,转化拟南芥分析其功能,并分析该基因的表达量与大白菜叶杂种优势之间的关系.为在大白菜中研究该基因的功能提供依据.”方法”利用RT-PCR从大白菜叶中分离出ARGOS同源基因的cDNA序列,采用DNAMAN软件分析该基因所编码的蛋白质的二级结构,通过半定量RT-PCR检测该基因在大白菜各器官中的表达水平,分析转基因拟南芥的表型鉴定该基因的功能,通过半定量RT-PCR分析该基因的表达量与大白菜叶的杂种优势之间的关系.”结果”根据拟南芥ARGOS序列,通过Blast检索到大白菜BAC库中的序列,根据该序列设计特异引物,以提取自日喀则叶片的RNA反转录产物为模板,通过PCR扩增出1个新的ARGOS的同源基因BrARGOS.对大白菜,拟南芥和番茄中3个基因所编码的蛋白质做序列比对分析发现,这3个蛋白质的C末端富含亮氨酸.BrARGOS蛋白的二级结构含有自由卷曲、伸展片段和α-螺旋.通过半定量RT-PCR分析,在大白菜各器官中均检测到BrARGOS基因的表达,在果荚中表达量最高,其次为子叶,茎生叶中表达量最低.通过PCR检测阳性转化体拟南芥基因组显示,NPTⅡ基因已经转入拟南芥基因组中,表明外源BrARGOS基因也同时转入拟南芥基因组中.与转空载体对照拟南芥相比,过量表达BrARGOS基因的转基因拟南芥的叶、花、叶鲜重和株高均显著增大/高.”结论”从大白菜自交系日喀则叶片中分离了1个新的ARGOS的同源基因BrARGOS,并分析了BrARGOS基因的表达模式和功能.在拟南芥中过量表达BrARGOS基因使拟南芥的地上器官显著增大.大白菜BrARGOS基因可能与调节植物器官大小有关.

关键词：大白菜、BrARGOS、器官大小、拟南芥

所属期刊栏目：42

分类号：S6(园艺)

资助基金：国家重点基础研究发展规划973计划2009CB126002;山东省农业科学院高技术自主创新基金2007YCX003

在线出版日期：2009-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2068-2075