10.3864/j.issn.0578-1752.2009.02.040
可阻断IBDV感染的抗CEF膜蛋白单克隆抗体的筛选
[目的]利用细胞融合技术及细胞免疫组化方法,筛选可特异性阻断鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染的抗鸡胚成纤维细胞(CEF)膜蛋白单克隆抗体,为进一步研究IBDV的CEF受体奠定基础.[方法]用CEF细胞免疫Ba1b/c小鼠,经细胞融合获得杂交瘤细胞上清.单层CEF用杂交瘤细胞上清孵育2 h后接种IBDV,病毒感染后固定细胞,先后与F22-EA6-Blotin及Streptavidin-HRP进行反应,最后用AEC染色,显微镜下计数,统计感染细胞减少的百分率以判定单抗上清阻断IBDV感染的效果.[结果]利用细胞组化的方法,共计检测了768株杂交瘤细胞上清,6株(1A5、1H11、2812,3G1、4D10和488)显示有阻断IBDV感染的效果,其中488可完全阻断IBDV对CEF的感染,该单抗针对的CEF膜蛋白很有可能是IBDV的细胞受体.[结论]筛选到的抗CEF膜蛋白的单抗可以阻断IBDV感染CEF,表明所建立的方法具有较高的敏感性和特异性.这些单抗可以用于进一步研究IBDV的CEF细胞受体.
鸡胚成纤维细胞、IBDV受体、Biotin Streptavidin
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S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)
国家自然科学基金;国家重点基础研究发展计划(973计划);国家科技支撑计划
2009-05-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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