小麦农杆菌介导转基因植株的稳定获得和检测

摘要：

以预培养4d的小麦幼胚愈伤组织为受体,LB培养基上激活培养3d或AB培养基上激活培养4d,并在WCC培养基中重悬的C58c1农杆菌菌系为供体,将含有目的基因、标记基因的pPTN249、pPTN254、pPTN270、pSIS-GFP等重组DNA质粒转入了小麦,经在含10～50mg/Lgeneticin(G418)、50mg/Lcefotaxime、50mg/Lvancomycin、50mg/L ticillicin选择培养基上多次选择,移栽前利用nptⅡ EISA检测,移栽后利用叶片离体退绿、PCR和Southern blot 4种方法综合检测,共获得了29株转基因植株,转化频率平均为0.82%.在所获得的转基因植株中,单拷贝整合植株占65.52%.研究结果还表明,不同基因型的转化效率显著不同,除了Bobwhite外,笔者也从扬麦l0号获得了转基因植株;ELISA测定值的高低与外源DNA整合的拷贝数有一定关系;初步建立了农杆菌介导稳定转化小麦的技术体系.

关键词：小麦、农杆菌、转基因植株、单拷贝整合

所属期刊栏目：34

分类号：S512.103.54(禾谷类作物)

资助基金：引进国际先进农业科学技术计划计划J99-A-40,991010

在线出版日期：2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：469-474