棉铃虫葡萄糖氧化酶HaGOX在毕赤酵母中的重组表达和性质研究

摘要：

毕赤酵母是使用最广泛、最具有发展前景的异源蛋白表达系统之一.在毕赤酵母GS115中实现了来源于棉铃虫(Helicoverpa armigera)葡萄糖氧化酶基因hagox的异源表达.以棉铃虫hagox基因连接pPICZαA质粒构建重组表达载体,电击转化毕赤酵母GS115H菌株后得到含有hagox基因的重组酵母菌株.通过平板显色、酶活力测定和SDS-PAGE分析,重组酵母中HaGOX成功表达.HaGOX含606个氨基酸,理论分子量66.9 kD,预测等电点pH 4.78.经测试重组HaGOX的最适pH为6.0～7.0,最适温度为40℃,对6-脱氧-葡萄糖和D-葡萄糖具有高催化活力,以D-葡萄糖为底物的比活力为13.63 U·mg-1,对其他吡喃糖和二糖没有催化活力.

关键词：葡萄糖氧化酶、棉铃虫、毕赤酵母、异源表达

所属期刊栏目：22

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目31972601

在线出版日期：2020-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：56-63