来源于嗜热古细菌Pyrococcus furiosus乳糖酶基因的原核表达及酶学性质分析

摘要：

以嗜热古细菌Pyrococcus furiosus的基因组DNA为模板,通过PCR克隆获得乳糖酶基因celB.将celB基因插入到表达载体pET-30a(+)上构建原核重组表达质粒pET-celB,转化大肠杆菌BL21,阳性转化子在28℃下经IFrG诱导4 h后进行SDS-PAGE电泳和酶活性测定,结果表明celB基因在大肠杆菌中获得高效表达,乳糖酶基因celB表达的乳糖酶蛋白CELB分子质量约为58kDa.CELB是耐高温酶,其酶促反应最适温度为105℃,在95℃至110℃之间热稳定性较好;pH5.0时该乳糖酶水解活力最高,在pH5.0～10.0之间,pH稳定性较好,该酶对金属离子依赖性不强.

关键词：乳糖酶、嗜热古细菌、酶学性质、原核表达

所属期刊栏目：10

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项

在线出版日期：2008-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：76-81