10.3321/j.issn:1007-4333.2006.02.013
用实时荧光定量RT-PCR方法定量绵羊PrP基因的表达
为快速、准确定量绵羊PrP基因的mRNA,建立了绵羊PrP基因实时荧光定量聚合酶链反应检测方法.根据已报道的绵羊PrP基因序列,设计合成引物;采用RT-PCR方法扩增目的片段;构建标准重组质粒制备标准曲线,用于样品检测.结果发现,中枢神经系统组织PrP基因的表达量(copies/ng总RNA,39420)比外周组织(为7845)的高;在中枢神经系统中,脑干的PrP基因的表达量最高(为67020);外周器官中,淋巴结PrP基因的表达量最高(为29086),肾脏的表达量最低(为125).建立绵羊PrP基因实时荧光定量PCR方法,对PCR扩增反应中每一个循环的产物进行定量分析,为进一步研究绵羊组织器官的PrP表达在传染性海绵状脑病发生中的作用提供基础数据.
朊蛋白、RT-PCR、基因表达、实时荧光定量PCR
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S826(家畜)
中国科学院资助项目30371062,30400325;高等学校博士学科点专项科研项目20020019006
2006-05-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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