核桃芽总RNA提取及RT-PCR

摘要：

为了从核桃芽体内提取高质量的RNA,以便进行核桃成花基因克隆研究,针对核桃芽体内富含多酚等次生代谢物的特点,在总结他人研究基础上对SDS法和CTAB法及试剂盒提取法进行了改良和比较。凝胶电泳检测表明：Spectrum Plant Total RNA试剂盒提取法及以pH 9.0硼砂为缓冲液的改良CTAB法和SDS法所提取RNA的28SrRNA和18SrRNA条带清晰,且28SrRNA的亮度约是18SrRNA的2倍,说明所提RNA完整性较好;紫外光谱分析显示,3种方法的OD260/OD280分别为1.99、1.96、1.77,OD260/OD230均〉2.0,RNA产率依次为360、180、75μg/（g.FW）。综合检测结果认为：改良CTAB法和改良SDS法所提RNA的完整性和纯度均能满足基因克隆等的研究,是一种适合核桃芽体内RNA提取的经济而有效的方法。

关键词：核桃、芽、RNA提取、硼砂、RT-PCR

所属期刊栏目：2

分类号：S664.1(果树园艺)

资助基金：国家自然科学基金“桃果实韧皮部糖卸载及转运蛋白基因克隆及表达特征”31171943

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：25-28,54