10.3969/j.issn.1000-484X.2023.05.007
RNAi沉默Survivin与ER-α36基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的影响
目的:靶向沉默人乳腺癌细胞Survivin与雌激素受体-α(ER-α)36 双基因的表达,探讨其对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的影响.方法:采用生物信息学技术设计并构建RNAi片段(siRNA-ER-α36),转染乳腺癌MDA-MB-231细胞株.采用噻唑蓝染色法检测细胞增殖情况.采用RT-PCR、Western blot方法检测细胞中Survivin、ER-α36与凋亡蛋白Cas-pase-3的mRNA及蛋白表达情况;流式细胞术检测转染细胞凋亡率.结果:RNAi片段成功转染MDA-MB-231细胞,24 h转染率的平均值为68%,48 h转染效率可达76%(P<0.01).与空白对照组比较,RNAi片段转染后MDA-MB-231细胞Survivin和ER-α 36基因的mRNA和蛋白含量明显下降(P<0.05),而上调Caspase-3凋亡蛋白的表达;MDA-MB-231细胞增殖能力降低(P<0.05),凋亡率升高(P<0.05).结论:RNAi靶向沉默并下调Survivin与ER-α36基因的表达,上调Caspase-3凋亡蛋白的表达,从而抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,促进细胞凋亡,提示RNAi沉默可成为对乳腺癌相关基因功能研究的主要技术之一.
RNA干扰、雌激素受体、乳腺癌、Survivin
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R392-3
吉林省卫生技术创新项目;吉林省卫生计生青年科技骨干培养计划项目
2023-05-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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