circZMIZ调节miR-24-3p/GPX4轴对前列腺癌细胞铁死亡的影响

摘要：

目的:探究circZMIZ1对前列腺癌(PCa)细胞铁死亡的影响及分子机制.方法:比较人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)和PCa细胞系(22Rv1、VCaP、PC3和DU145)中circZMIZ1、miR-214-3p以及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA和蛋白表达;通过双荧光素酶报告基因、RNA pull-down和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验验证PC3细胞中circZMIZ1、miR-214-3p和GPX4的调控关系.PC3细胞转染si-NC、si-circZMIZ1、inhibitor-NC、miR-214-3p inhibitor后,检测细胞中circZMIZ1、miR-214-3p和GPX4的表达、细胞增殖、LDH活性、细胞凋亡以及细胞内亚铁离子(Fe2+)含量和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平,细胞内活性氧(ROS)水平.构建PCa裸鼠皮下移植瘤模型,观察肿瘤生长情况,检测肿瘤组织中Ki-67、GPX4、circ?ZMIZ1、miR-214-3p表达情况.结果:与RWPE-1细胞相比,PCa细胞系(22Rv1、VCaP、PC3和DU145)中circZMIZ1、GPX4 mRNA和GPX4蛋白水平升高,miR-214-3p水平降低(P<0.05).circZMIZ1可以靶向结合PCa细胞中的miR-214-3p,GPX4是miR-214-3p的靶标.敲低circZMIZ1可上调miR-214-3p表达,降低GPX4表达,抑制PC3细胞增殖,促进LDH释放,诱导细胞凋亡,且敲低circZMIZ1可增加细胞内Fe2+含量和提高MDA、ROS水平,降低GSH水平(均P<0.05);下调miR-214-3p可减弱敲低circZMIZ1对PC3细胞铁死亡的影响(均P<0.05).裸鼠移植瘤结果显示,敲低circZMIZ1可抑制裸鼠体内肿瘤生长,并上调miR-214-3p、降低肿瘤组织Ki-67和GPX4表达(均P<0.05),该作用被miR-214-3p下调减弱.结论:敲低circZMIZ1可能通过miR-214-3p/GPX4轴诱导PCa细胞铁死亡.

关键词：前列腺癌、circZMIZ1、铁死亡、miR-214-3p、谷胱甘肽过氧化物酶4

所属期刊栏目：39

分类号：R737.25(肿瘤学)

资助基金：云南省教育厅科学研究基金项目2022J0698

在线出版日期：2023-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：330-335,342