内质网通道蛋白Sec61在PM2.5诱导支气管上皮细胞BEAS-2B高表达MUC5AC中的作用

摘要：

目的:探讨内质网通道蛋白Sec61在PM2.5诱导支气管上皮细胞BEAS-2B高表达黏蛋白5AC(MUC5AC)中的作用.方法:使用不同浓度的PM2.5(0、25、50、100、200μg/ml)刺激BEAS-2B不同时间(0、6、12、24、48 h),蛋白质免疫印迹和免疫荧光染色检测细胞中Sec61的表达.实验分为4组,即对照组、PM2.5组、siRNA-Control组、siRNA-Sec61组,除对照组外其余三组均进行PM2.5刺激,siRNA-Control组和siRNA-Sec61组分别使用转染对照或Sec61干扰序列的细胞.荧光定量聚合酶链式反应和Western blot检测细胞中Sec61、MUC5AC、GRP78的表达,免疫荧光染色检测细胞中MUC5AC和游离钙离子的表达.结果:随着PM2.5刺激浓度增加和刺激时间延长,Sec61的表达量逐渐升高,100μg/ml刺激48 h时,Sec61的表达量最高.与PM2.5组和siRNA-Control组相比,siRNA-Sec61组细胞中Sec61 mRNA和蛋白质的表达量降低(P<0.05);MUC5AC mRNA和蛋白质的表达量降低(P<0.05);GRP78 mRNA和蛋白质的表达量降低(P<0.05);细胞中游离钙离子的荧光强度明显降低.结论:PM2.5可以诱导Sec61高表达,呈浓度依赖性和时间依赖性.使用小分子RNA沉默Sec61表达可以显著抑制MUC5AC高表达,可能与调节内质网应激和钙离子稳态有关.

关键词：小干扰RNA、Sec61、PM2.5、黏蛋白5AC、内质网应激、钙离子

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分类号：R562.21(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：海南医学院第一附属医院2017年度青年培育基金HYFYPY201705

在线出版日期：2020-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2694-2699