重组RPLP0蛋白的表达、鉴定及评价

刘剑平1卢小岚1张国元1杜琴1梁骑2王东生1王强2王舒琪2罗文依2

1.川北医学院附属医院; 2.川北医学院;

摘要：

目的:构建重组RPLP0蛋白的原核表达载体并诱导表达,对表达产物进行纯化鉴定及评价.方法:设计重组RPLP0蛋白基因,经PCR扩增获得目的基因;在其5′和3′端引入BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点,构建pET41a-GST-RPLP0-6?His融合基因表达载体;对该质粒载体进行酶切鉴定和测序验证,将鉴定正确的重组质粒载体转化至大肠杆菌并以IPTG诱导表达;经过尿素溶液纯化及复性以后得到复性的重组RPLP0蛋白;采用Western blot分析重组RPLP0蛋白的免疫原性;采用ELISA法对其抗体结合性、特异性进行分析.结果:酶切及测序结果显示,本实验成功克隆出重组RPLP0蛋白基因,将获得的目的基因构建…展开v

关键词：RPLP0、重组质粒、重组蛋白、蛋白表达

所属期刊栏目：35

分类号：R392.9

资助基金："十二五"国家科技支撑计划2015BA K45B00;四川省科技厅应用基础项目2016JY0171 和四川省教育厅科技成果转化重大培育项目17CZ0015

在线出版日期：2019-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1857-1861