一种通用循环免疫复合物抗体解离技术的建立及应用评价

摘要：

目的:建立一种通用循环免疫复合物(CIC)抗体解离技术,并评价其应用价值.方法:采用已建立的聚乙二醇(PEG)二次沉淀分离技术对标本中的CIC进行高效分离,然后运用Gly-HCl缓冲系统和正交设计方法对HBsAg-IC中的anti-HBs解离实验条件进行优化选择,建立通用的CIC抗体解离技术,并对其方法学性能及应用进行初步评价.结果:HBsAg-IC中anti-HBs的最佳解离条件为:CIC抗体解离剂pH1.80,15℃解离5～10 min,振荡频率>60次/min,加入CIC抗体中和剂后10 min内测定;该技术对HBsAg-IC的anti-HBs平均解离率为64.3％,重现性<5.97％,线性良好(r=0.9932),平均回收率95.4％,特异性100％,试剂稳定性均>12个月;HCV-IC、HIV-IC、Ins-IC、TG-IC的解离条件与HBsAg-IC基本相同,但CIC中抗体解离率有差异;该技术对不同HBV-M模式HBsAg-IC中的anti-HBs含量和检出率具有统计学差异(P<0.05),对HCV-IC、HIV-IC、INS-IC、TG-IC中的相应抗体检出率分别为34.8％、66.7％、20.0％、14.3％.结论:CIC抗体解离技术是一种通用前处理技术,它能够对多种CICs进行沉淀、分离、解离后直接测定抗体,具有一定的应用价值.

关键词：循环免疫复合物、PEG沉淀分离法、CIC抗体解离技术、应用评价

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分类号：R392-33

资助基金：国家发明专利[ZL201410033277.4,2016-4-62016]、浙江省自然科学基金LY15H200001;南京军区医药卫生科研基金12MA117,15DX025;浙江省医药卫生科技计划项目2016KYB250,2018238953;杭州市科技发展计划项目20160533B75;杭州市卫生科技计划项目2017B71

在线出版日期：2019-01-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：64-68,73