粉尘螨变应原第7组分(Der f 7)重组蛋白单克隆抗体的制备

摘要：

目的:克隆表达粉尘螨变应原第7组分(简称Der f 7)重组蛋白,制备抗Der f 7单克隆抗体,并进行鉴定.方法:用pET28a(+)-Der f 7原核表达体系表达Der f 7重组蛋白,以此免疫BALB/c小鼠,将骨髓瘤细胞和脾细胞融合,经ELISA法筛选杂交瘤细胞.用杂交瘤细胞注射入小鼠腹腔,获得腹水,经蛋白A琼脂糖介质纯化,后鉴定抗体的效价、纯度,采用免疫印迹法鉴定抗体的特异性.结果:获得三株稳定分泌重组Der f 7单克隆抗体的杂交瘤细胞,产生的抗体纯度高,效价高于1∶243 000.Western blot显示能很好地识别Der f 7重组蛋白.为Der f 7变应原的定量、定位及相关过敏性疾病的诊疗奠定基础.结论:成功获得粉尘螨变应原第7组分(Der f7)重组蛋白单克隆抗体,且抗体效价纯度及特异性较好.

关键词：Derf7、单克隆抗体、粉尘螨、变应原

所属期刊栏目：33

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金项目NSFC31272369,NSFC81001330;盐城市医学科技发展计划YK2015054;江苏省卫生职业院校文化建设课题JCH201506;江苏省大学生创新创业计划201612682006Y

在线出版日期：2017-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1039-1042