NF－κB P65 siRNA对 IL－17诱导下MCP－1表达的影响作用

摘要：

目的：研究NF－κB P65 siRNA对IL－17诱导下心肌细胞MCP－1表达的影响作用。方法：差速贴壁法分离乳鼠心肌细胞进行原代培养。利用阳离子脂质体将NF－κB P65 siRNA瞬时转染入小鼠心肌细胞，荧光定量RT－PCR和酶联免疫吸附法（ ELISA）分别检测NF－κB P65 siRNA对IL－17诱导下MCP－1 mRNA和蛋白的含量变化。荧光定量RT－PCR和Western blot检测IL－17作用下P－P65和P65 mRNA和蛋白含量变化。结果：与转染阴性对照siRNA组相比，转染阴性对照siRNA＋IL－17组MCP－1 mRNA和蛋白表达水平明显增加（P＜0．05）。与转染阴性对照siRNA组相比，转染NF－κB P65 siRNA组MCP－1 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P＜0．05）。与转染阴性对照siRNA＋IL－17组相比，转染NF－κB P65 siRNA＋IL－17组MCP－1 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P＜0．05）。 NF－κB P65 siRNA转染24 h后，NF－κB P65在基因及蛋白水平表达均被明显抑制（P＜0．05）。 IL－17作用心肌细胞不同时间后，检测发现随时间增加P－P65蛋白含量逐渐增加，15 min到达高峰，随后逐渐下降，各作用时间与空白对照组比较，差异有统计学意义（ P＜0．05），而P65蛋白含量变化不大，各作用时间与空白对照组比较，差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：IL－17可以通过促进心肌细胞内NF－κB P65磷酸化上调MCP－1的表达，而NF－κB P65 siRNA能够通过沉默P65基因表达有效抑制IL－17对MCP－1的上调作用。

关键词：白介素17、单核细胞趋化蛋白1、病毒性心肌炎、核转录因子kappa B、小干扰RNA

分类号：R392.11

在线出版日期：2015-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1333-1336,1346