抗T SL P全人源单链抗体筛选与初步鉴定

摘要：

目的：表达TSLP蛋白，从全人源单链抗体文库中筛选得到抗TSLP单链抗体。方法：扩增TSLP cDNA，将目的基因与表达载体pET101／D-TOPO连接，转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导表达并对表达产物进行纯化鉴定。以生物素化的TSLP蛋白为抗原从前期构建的全人源抗体文库中采用噬菌体展示技术筛选抗TSLP全人源单链抗体（ scFv ）。结果：扩增的TSLP cDNA片段大小为423 bp左右。表达的TSLP蛋白大小为26 kD左右，Dot blot及Western blot鉴定显示表达的蛋白正确，为TSLP目的蛋白。以生物素化的TSLP蛋白为抗原，采用噬菌体展示技术对全人源抗体文库进行3轮富集，通过ELISA检测有35％的scFv与TSLP有结合特性。将筛选的与TSLP结合能力强的单链抗体进行了Western blot鉴定和测序。结论：成功筛选到抗TSLP全人源单链抗体。

关键词：TSLP、人源单链抗体、筛选

分类号：R392.11

资助基金：四川省青年基金2012JQ0018;泸州市科技局项目2013LZLY－K77;四川省卫生厅项目130259。

在线出版日期：2015-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1662-1665,1669