黄曲霉毒素M1人工抗原的制备及鉴定

摘要：

目的：合成黄曲霉毒素M1（Aflatoxin M1，AFM1）免疫抗原和检测抗原，并对其进行鉴定。方法：采用肟化法改造AFM1，并用薄层色谱法监测肟化反应进程，对肟化物鉴定。将肟化物分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上，得到免疫原AFM1-BSA和检测原AFM1-OVA，然后分别用紫外分光光度法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法（ SDS-PAGE）对合成抗原进行鉴定。经动物免疫试验获得鼠源多抗血清，用酶联免疫吸附法（ ELISA）对多抗血清进行检测，判断抗原是否偶联成功。结果：肟化改造后，肟化物在薄层板上的迁移距离缩短；偶联物AFM1-BSA在274 nm处出现最大吸收峰，且与BSA和AFM1的紫外吸收峰都不重合；AFM1-BSA的泳动速度明显小于BSA；免疫的3只小鼠效价均在1×10-4左右，其中3号小鼠多抗血清敏感性最好，半数抑制浓度IC50（50％inhibitive concentration ，IC50）为359.9 ng/ml。结论：本试验成功制备出AFM1人工抗原，并得到了敏感性好的鼠源多抗血清。

关键词：AFM1、人工抗原、合成、鉴定、多克隆抗体

分类号：S859.84(动物医学（兽医学）)

资助基金：农业部公益性行业农业科研专项201203040;河南省扶持企业自主创新资金项目资助。

在线出版日期：2014-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：789-793