10.3969/j.issn.1000-484X.2013.02.003
BCG对小鼠RAW264.7巨噬细胞miR-203、miR-142-3p、miR-21表达的影响
目的:检测卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,BCG)刺激巨噬细胞后miR-203、miR-142-3p、miR-21表达量的变化,为研究microRNA(miRNA)在巨噬细胞抗结核分枝杆菌免疫应答中的调控作用提供依据.方法:利用浓度为1.0 ×107ml-1的BCG刺激培养的小鼠RAW264.7细胞,分别在4、8、12、24小时提取细胞small RNA,并利用相应的茎环反转录引物,反转录成cDNA,同时构建成熟miR-203、miR-142-3p、miR-21的T载体,绘制标准曲线,利用Real-Time PCR检测miR-203、miR-142-3p、miR-21的表达量.结果:BCG作用RAW264.7细胞4、8、12、24小时后,miR-21表达显著性上调(10倍以上,P<0.05),miR-142-3p表达显著性下调(20倍以上,P<0.05),miR-203在4、8、12小时表达下调(3倍以上,P<0.05),24小时后表达上调(2倍以上,P<0.05).结论:BCG刺激RAW264.7巨噬细胞后,miR-203、miR-142-3p、miR-21的表达发生显著性变化,说明这些miRNA可能通过调控免疫相关基因在巨噬细胞抗结核分枝杆菌的免疫应答中发挥着重要的作用.
miRNA、BCG、real-time PCR
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R392.1
国家自然科学基金资助项目31160494,30960275;教育部"新世纪优秀人才支持计划"项目NCET 11-11023;中国博士后基金项目20110491554;宁夏医科大学"博士学位建设学科"开放课题KF2010-41
2013-04-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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