抗人CD25嵌合抗体的稳定表达及鉴定

摘要：

目的:构建抗人CD25嵌合抗体稳定细胞株,并对表达产物进行相关鉴定.方法:构建CD25嵌合抗体稳定表达质粒VEC-VTacH和3.3-VTacL并稳定转染CHO-DHFR-细胞,经选择性培养、有限稀释法克隆和MTX加压选择后扩大培养构建的工程细胞,Protein A纯化回收目的抗体后分别进行质谱分析、蛋白质N端测序和平衡解离常数(Kd)的测定.结果:CD25嵌合抗体稳定细胞株的抗体表达水平约为3.74~7.07 μg/ml,质谱分析结果表明其含有鼠源成分和人源成分,蛋白质N端测序表明其与亲本抗体N端序列完全一致,其Kd为2.35×10-10 mol/L,而亲本抗体的Kd为1.88×10-10 mol/L.结论:抗人CD25嵌合抗体保留了亲本抗体的抗原结合活性和亲和力.

关键词：CD25、嵌合抗体、表达、鉴定

所属期刊栏目：28

分类号：R392.12

在线出版日期：2013-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1115-1119