10.3969/j.issn.1000-484X.2012.11.001
IFITM3基因的克隆及其在真核细胞中的表达与定位研究
目的:干扰素rhIFN-α 2B体外诱导人胚胎肾细胞系293T细胞获得IFITM3基因,观察IFITM3基因在293T细胞中的表达与定位.方法:利用干扰素rhIFN-α 2B体外诱导293T细胞获得IFITM3基因,采用RT-PCR技术扩增获得干扰素诱导的跨膜蛋白IFITM3全长cDNA,扩增产物连接至pMD18-T载体上,测序正确后,将IFITM3基因亚克隆至真核表达载体pVAX1中获得重组质粒pV-IFITM3,通过转染293T细胞进行表达与定位研究.结果:RT-PCR和Western blot结果表明,获得的目的基因IFITM3能够表达,且具有良好抗原活性;激光共聚焦显微镜观察显示,IFITM3基因表达后主要分布于细胞膜上.结论:成功获得IFITM3基因,并验证了其表达.该研究为基于IFITM3的抗病毒药物以及探讨其抗病毒机制研究奠定了坚实基础.
IFITM3、克隆、表达、定位
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Q781(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金81001342;973计划2011CB512110;吉林省自然科学基金201015116
2013-02-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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