GnRH-A免疫对GnRHR、FSH-β和LH-β表达及生物信息学特性的影响

摘要：

目的:探讨GnRH-A主动免疫对垂体GnRHR、FSH-β和LH-β基因表达和生物信息学特性的影响,进而研究GnRH-A的作用机理.方法:30只日本大耳白兔(Oryctolagus cuniculus)随机均分为三组,在EG-Ⅰ和EG-Ⅱ皮下注射1.0 ml(100 μg/ml)GnRH-A抗原,EG-Ⅱ于20天以相同剂量加强免疫一次,对照组不做任何处理.70天颈动脉放血致死实验兔,无菌采集垂体.从兔垂体中提取总RNA,GnRHR,FSH-β和LH-β mRNA基因扩增、克隆和测序,实时荧光定量PCR分析mRNA基因的表达.用DNAMAN、Tmpred、SignalP、TargetP、Expasy等生物信息学分析软件和在线工具,对GnRHR序列和蛋白的理化特性、跨膜结构、信号肽及二级结构等进行分析和预测.结果:EG-Ⅰ和EG-Ⅱ的GnRHR mRNA低于对照组(P<0.01),EG-Ⅱ又低于EG-Ⅰ(P<0.05);EG-Ⅰ和EG-ⅡFSH-β mRNA和LH-β mRNA极显著低于对照组(P<0.01),EG-Ⅰ与EG-Ⅱ间也具有显著差异(P<0.05).GnRHR核苷酸为1 179 bp,与NM-001082738的同源性达96%,核苷酸中含A 28.7%,C 24.9%,G 19.0%,T 27.5%.GnRHR的线粒体转运肽、信号肽及转运肽长度发生了明显改变.与NM-001082738的比较显示,GnRHR mRNA的核苷酸、氨基酸、分子量、脂肪指数和平均疏水性均变小,而不稳定指数、α螺旋和β折叠数均增加.结论:GnRH-A免疫可明显降低雄兔垂体GnRHR、FSH-β和LH-β mRNA基因的表达,而且对GnRHR的生物信息学特性具有一定的影响,加强免疫作用更明显;GnRHR是一种含有信号肽的不稳定的疏水性跨膜蛋白.

关键词：阿拉瑞林、GnRH受体、垂体、基因表达、生物信息学、雄兔

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分类号：S852.2;R392.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家民委2007年度重点资助项目MW2007-ZD-027

在线出版日期：2011-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：232-235