小鼠PD-1 胞外区基因片段表达、纯化及其多克隆抗体的制备

刘朝奇唐国慧覃晓琳金羽

三峡大学;

摘要：

目的:原核表达并纯化小鼠PD-1膜外区(以下简称mPD-1)蛋白,制备其多克隆抗体.方法:原核表达质粒pGEX-4T-1/mPD-1转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白的表达.对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western blot检测.利用蛋白质纯化仪纯化蛋白.使用纯化蛋白免疫日本大耳白兔3次后,分离抗血清,ELISA法测定兔多克隆抗体滴度.用其制备的多克隆抗体通过细胞免疫荧光方法(CIF)和FCM检测高表达PD-1全长基因的L929细胞.结果:诱导表达并纯化了GST-mPD-1重组蛋白,得到相对分子质量(Mr)约42 000的mPD-1蛋白.纯化蛋白免疫动物后,产…展开v

关键词：mPD-1、蛋白表达、抗体、免疫原性

所属期刊栏目：26

分类号：R392.11

资助基金：湖北省自然科学基金资助项目2008CDB118;三峡大学研究生科研创新基金项目2009-36

在线出版日期：2010-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：919-922