PcDNA3.1-rhGM-CSF表达质粒的构建及其对K562细胞生长与分化的影响作用

摘要：

目的:观察GM-CSF对髓系白血病细胞(K562)生长、分化的影响作用.方法:采用PCR、T-A克隆及基因定向克隆技术,将rhGM-CSF基因插入PcDNA3.1(+)空载体中,构建了PcDNA3.1-rhGM-CSF真核表达载体.经限制性内切酶消化和DNA测序鉴定确认,转染人K562髓系白血病细胞、72小时后采用细胞形态学检测、MTT试验、免疫组化技术观察和分析PcDNA3.1-rhGM-CSF在K562细胞中的表达及其影响该细胞生长与分化的作用.结果:①成功构建PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体;②重组质粒PcDNA3.1-rhGM-CSF能在K562细胞中表达,并诱导K562细胞向单核细胞系、巨噬细胞系分化;③K562细胞增殖受到明显抑制.结论:成功构建了PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体;转染K562细胞能向单核细胞系、巨噬细胞系分化.

关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、重组表达载体、细胞分化、K562

所属期刊栏目：26

分类号：R733.7(肿瘤学)

资助基金：四川省科技厅项目资助2009SZ0260

在线出版日期：2010-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：494-497,502