RhoC沉默抑制卵巢癌细胞的生长及转移

摘要：

目的:探讨RNA干扰技术沉默Ras homolgyC(RhoC)对卵巢癌细胞SKOV3细胞运动和侵袭力的影响.方法:利用Invitrogenis RNAi Designer 软件设计并构建RhoC的干扰RNA(miRNA)载体,利用质脂体介导法将RhoC miRNA及非特异miRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,经blasticdin进行稳定筛选出抗性克隆;将实验分为RhoC miRNA组(转染特异miRNA)、非特异miRNA组(转染非特异性miRNA)、空白对照组(不转染RhoC miRNA).Western blot检测3组卵巢癌细胞中RhoC蛋白表达水平;同时检测对卵巢癌细胞体外运动及侵袭的抑制作用.结果:SKOV3细胞稳定转染后,转染特异性miRNA组RhoC蛋白表达量[0.198 9(4 257/21 498)]与转染非特异miRNA组[2.142(38 245/17 855)]和空白对照组[2.604(48 872/18 768)]相比,差异均有统计学意义(P＜0.01),而非特异性组与空白对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05);体外细胞运动实验表明,转染特异性miRNA组与转染非特异性miRNA组及空白对照组跨膜细胞数[分别为(52±3)个、(401±28)个及(432±28)个/高位镜(×200)] 比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),而转染非特异性miRNA组与空白对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05).重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,以上3组穿透基底膜细胞数[分别为(48±9)个、(386±26)个及(424±25)个/高位镜(×200)]比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),而后两组之间无统计学意义(P＞0.05).结论:抑制卵巢癌SKOV3细胞RhoC蛋白的表达对卵巢癌细胞的运动及侵袭有抑制作用,这可能为卵巢癌转移的基因治疗提供新的靶点.

关键词：卵巢肿瘤、RNA、RhoC蛋白、侵袭

所属期刊栏目：25

分类号：R730.51(肿瘤学)

资助基金：吉林省科技厅攻关项目资助课题2006415-3

在线出版日期：2009-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：425-429