人AITRL胞外区基因克隆表达及重组蛋白生物活性分析

摘要：

目的:获得重组人活化诱导的肿瘤坏死因子超家族配体胞外区蛋白(sAITRL),分析AITRL蛋白的生物学功能.方法:从全长质粒AITRL-pMD18-T中扩增sAITRL cDNA,亚克隆至表达载体pQE30;将重组质粒转化至 E. coli M15,IPTG诱导蛋白表达;表达蛋白用Ni2+ -IMAC柱纯化、复性并Western blot鉴定,流式细胞仪检测sAITRL重组蛋白的结合活性,增殖试验分析sAITRL的生物学活性.结果:成功构建了sAITRL-pQE30原核表达载体;表达相对分子质量约15 KD的重组蛋白;sAITRL能与活化淋巴细胞上的天然受体AITR结合,低浓度的sAITRL能促进淋巴细胞的增殖,而在高浓度下则抑制了淋巴细胞的增殖.结论:成功表达了具有生物学活性的sAITRL重组蛋白,AITR-AITRL相互作用在调节淋巴细胞增殖过程中起重要作用.

关键词：活化诱导的肿瘤坏死因子超家族配体、基因克隆、原核表达、重组蛋白

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分类号：R392.12

资助基金：江苏省自然科学基金BK2004405;江苏大学校科研和教改项目05JDG042;国家自然科学基金30300169

在线出版日期：2008-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1059-1063