Transwell侵袭小室技术的改良及其在人骨髓间充质干细胞诱导分化中的应用

摘要：

目的:分离、培养和鉴定人骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs),应用改良的Transwell侵袭小室技术,探讨血管内皮生长因子(VEGF)及内皮细胞条件诱导液对其体外诱导分化中的作用.方法:采用Percoll(1.073 g/ml)分离液分离骨髓单个核细胞,体外培养MSCs,流式细胞术分析鉴定MSCs的纯度,Transwell侵袭小室技术结合LSCM,实时监测MSCs在Matrigel与VEGF/内皮细胞条件诱导液构成的内皮细胞生长微环境中的运动迁移情况.结果:经Percoll分离、体外培养扩增的MSCs,细胞纯度可达95%左右;VEGF组迁移的深度虽高于对照组(P＜0.05),但迁移至聚碳酸脂膜下的细胞与对照组相比,并无统计学意义(P＞0.05).内皮细胞条件诱导液促进MSCs的迁移,在Matrigel内迁移的深度及迁移至聚碳酸脂膜下的细胞均明显多于对照组(P＜0.05).结论:共聚焦激光扫描显微术与Transwell侵袭小室技术的结合,能够从时间和空间上对后者进行观察,使该实验得到改良;利用内皮细胞条件诱导液与Matrigel模拟体外内皮细胞生长的微环境,并从空间上观测了MSCs穿越人工基底膜的情况,为MSCs向内皮细胞体外诱导开辟了新的思路.

关键词：骨髓间充质干细胞、血管内皮生长因子、改良的Transwell侵袭小室技术、激光扫描共聚焦显微镜

所属期刊栏目：22

分类号：R331.22(人体生理学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2004AA205020;吉林大学校科研和教改项目419070100049

在线出版日期：2007-01-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1079-1082