联合应用错配PCR和交替延伸PCR法提高抗TNFα抗体亲和力

摘要：

目的:通过突变方法提高抗TNFα单链抗体pscTNF的亲和力.方法:以pscTNF质粒为模板,应用错配PCR构建突变抗体库,筛选亲和力得到改善的变种,再以所获变种为模板,用交替延伸PCR技术,再次构建突变库,筛选活性得到改良的克隆.以斑点ELISA方法及硫氰酸盐洗脱ELISA法评估其亲和力的改善.结果:从错配PCR抗体库中筛选得到7个活性有所增强的变种,再通过交替延伸PCR使这7个变种的突变位点交换重组,获得了亲和力进一步提高的克隆.结论:联合应用错配PCR和交替延伸PCR法可提高单链抗体亲和力.

关键词：错配PCR、交替延伸PCR、抗体亲和力、斑点ELISA

所属期刊栏目：20

分类号：R392-33

资助基金：解放军医药卫生重点项目01Z015

在线出版日期：2005-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：846-849