HIV-1囊膜糖蛋白gp41三聚体结构域基因的表达及其单克隆抗体的制备
目的:表达HIV-1囊膜糖蛋白gp41三聚体结构域基因N51(L6)C46融合蛋白,并制备针对该融合蛋白的单克隆抗体(mAb),为筛选抗HIV多肽及分析gp41表位的免疫原提供抗体工具.方法:在BL21(DE3)中诱导表达N51(L6)C46融合蛋白,经mAb NC-1鉴定后,采用小鼠腹股沟皮下NC膜免疫的方法免疫小鼠,并进行细胞融合、克隆化制备抗N51(L6)C46 mAb,用ELISA法初步鉴定其特异性位点.结果:获得了高表达的N51(L6)C46融合蛋白,并能与识别特异性空间构象的mAb NC-1反应.用该融合蛋白免疫小鼠后,获得了6株抗N51(L6)C46的mAb,这6株mAb均特异识别兔抗N36(L6)C34抗体捕获的融合蛋白,但不与N36或C34多肽片段反应.结论:得到高效表达融合蛋白N51(L6)C46,并呈现gp41核心结构空间构象.用此蛋白免疫小鼠得到6株特异结合gp41核心结构空间构象的单抗.
HIV-1 gp41、原核表达、单克隆抗体
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R392.11
2004-08-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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