猪ZP4 B细胞表位人源化定点突变

摘要：

目的:对编码猪ZP4的cDNA序列进行人源化定点突变,使原来编码LDPENLTL八肽表位的序列突变成编码相应人卵透明带上LDPEKLTL序列,同时保持其他序列不变.方法:采用PCR重叠延伸法,连续进行3次PCR,对PZP4B细胞LDPENLTL八肽表位进行定点突变.第3次PCR以前两次PCR的产物为模板,最终得到所需的突变体hpZP4和dpZP4.结果:突变后的cDNA序列通过重组DNA技术,在突变体片段5′及3′末端分别引入SalI和NcoI内切酶位点,使其克隆入pBV221表达质粒中,制成hpZP4-pBV221,pZP4-pBV221和dpZP4-pBV221重组质粒.经测序,证明均为目的序列.结论:通过定点突变产生人源化猪ZP4B细胞表位是可行的.研究将为人类克隆并制备新的人卵透明带避孕疫苗奠定基础.

关键词：卵透明带、B细胞表位、人源化定点突变、免疫避孕疫苗

所属期刊栏目：20

分类号：R392.11

资助基金：面向21世纪教育振兴行动计划985计划985B36;上海市计生委科研项目;国家重点实验室基金B2-02-1

在线出版日期：2004-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：184-186