封闭趋化因子受体的单链vMIP-Ⅱ的表达纯化及活性鉴定

摘要：

目的:研究病毒基因来源的人趋化因子同源物vMIP-Ⅱ的活性单链重组物在原核细胞的表达及制备方法,为大量获取单链vMIP-Ⅱ和其用于趋化因子受体封闭因子的临床应用打下基础.方法:采用双酶切定点克隆、渗透法破碎菌体,并用MBP亲和层析及重组肽段自脱离方式对表达产物进行纯化.纯化产物用SDS-PAGE蛋白印迹及抑制粘附反应等方法进行鉴定.结果:融合蛋白MBP-vMIP在原核细胞中高效分泌型表达,MBP-vMIP在体外自断裂分离出vMIP-Ⅱ,终产物单链vMIP-Ⅱ具有结合趋化因子受体CCR5活性.结论:vMIP-Ⅱ在原核细胞中的融合表达及终产物自脱离法可用于大量获取重组单链vMIP-Ⅱ.单链vMIP-Ⅱ对人趋化因子受体的结合活性有可能对与此受体有关的疾病如HIV感染、慢性炎症过程有作用.

关键词：病毒趋化因子、融合表达、自动裂解、人类免疫缺陷病毒(HIV)、大肠杆菌

所属期刊栏目：18

分类号：R512.91(传染病)

资助基金：国家自然科学基金30070697;广东省自然科学基金990470;国家高技术研究发展计划863计划2001AA215271

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：525-528