人MAdCAM-1真核表达载体的构建及其表达细胞株的建立

摘要：

目的:建立表达人MAdCAM-1的细胞模型.方法:从pUC21/hMAdCAM-1质粒酶切下hMAdCAM-1全长cDNA片段,将其克隆于巨细胞病毒载体pCIneo中,构建出由CMV启动子控制的重组真核表达载体pCIneo-hMAd,经脂质体介导转染至CHO细胞,以G418筛选抗性克隆.结果:筛选出的阳性克隆细胞以免疫荧光和免疫酶标染色法检测,表明有人MAdCAM-1分子表达;其细胞裂解物经免疫印迹分析,证实约63kD的新增蛋白带与抗hMAdCAM-1抗体有特异性结合反应;淋巴细胞粘附实验结果提示表达产物具有一定的功能活性.结论:成功地获得了表达人MAdCAM-1分子的细胞株,为进一步研究其生物学功能及其作用机制奠定了基础.

关键词：粘膜血管地址素、真核表达、中华仓鼠卵巢细胞

所属期刊栏目：18

分类号：R392.11

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划G1999 054103

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：9-12