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噬菌体抗体库技术筛选结肠癌单抗MC3的抗独特型抗体

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目的:获得结肠癌单抗MC3的噬菌体呈现型抗独特型抗体(anti-Id)。方法:分离经单抗免疫鼠脾脏的mRNA,经RT-PCR分别扩增抗体VH和VLDNA,进而连接形成ScFv DNA。将ScFv DNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7挽救后获得噬菌体呈现型ScFv文库。以MC3对文库进行四轮筛选后,随机挑取克隆经ELISA筛选呈现anti-Id ScFv的噬菌体单克隆。结果:VH、VL和ScFv DNA分别约为340、320和750 bp。抗体ScFv文库经四轮筛选后,在随机筛检的50个克隆中得到15个呈现anti-Id ScFv的噬菌体单克隆。结论:用噬菌体抗体库技术成功地获得了单抗MC3的anti-Id ScFv,从而为进行结肠癌重组anti-Id疫苗作用的研究提供了候选分子。

结肠癌、抗独特型抗体、抗体库、噬菌体

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R735.303(肿瘤学)

2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共4页

358-360,362

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中国免疫学杂志

1000-484X

22-1126/R

17

2001,17(7)

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